Estudio de la función de la Cx43 a nivel exosomal en melanoma

Abstract

[Resumen] Diferentes tipos de cáncer como es el caso del melanoma, se caracterizan por la pérdida de la comunicación intercelular mediante uniones comunicantes (UCs) y/o la regulación negativa de conexinas (Cxs). Las Cxs se han descrito como factores supresores de tumores en etapas tempranas del melanoma. Sin embargo su papel es controvertido durante la invasión de células tumorales y el proceso de metástasis. Las vesículas extracelulares y los exosomas liberados por las células participan en la comunicación celular y en la progresión tumoral. La proteína transmembrana conexina 43 (Cx43) puede formar parte de los exosomas y participa en la transferencia de información entre la célula diana y el exosoma a través de UCs. El objetivo principal de este trabajo fue estudiar la función de la Cx43 a nivel exosomal en progresión tumoral en melanoma. Los resultados de este trabajo indicaron que la Cx43 está presente en exosomas derivados de las células de melanoma que expresan de forma ectópica la Cx43 (A375-vCx43). La Cx43 a nivel exosomal disminuyó la proliferación celular y el crecimiento de colonias de líneas celulares de melanoma metastásico. El análisis del componente proteico de exosomas positivos y negativos para la Cx43 mediante espectrometría de masas mostró un cambio en la función de la partícula exosomal en presencia de la Cx43. Los resultados indican que la Cx43 a nivel exosomal, a través de su función de andamiaje, podría estar involucrada en el reclutamiento de proteínas y otras moléculas hacia los exosomas, cambiando su función en el progreso de melanoma. Una mayor comprensión del papel de Cx43 a nivel exosomal podría repercutir positivamente en el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas para combatir el melanoma metastásico.

[Resumo] Sábese que a perda da comunicación intercelular mediante unións comunicantes (UCs) e/ou a regulación negativa das conexinas (Cxs), dáse en diferentes tipos de cancro, incluído o melanoma. As Cxs describíronse como supresores tumorales en estadíos temperás do melanoma. Namentres, durante a invasión das células tumorales e a metástase, o seu papel é controvertido. As vesículas extracelulares e os exosomas liberados polas células, participan na comunicación celular e poden participar na progresión tumoral. A proteína transmembrana conexina 43 (Cx43) foi atopada nos exosomas e participa na transferencia de información á célula diana a través de UCs. O obxetivo principal deste traballo foi coñecer o papel da Cx43 presente nos exosomas de liñas de melanoma durante a progresión tumoral. Os resultados amosaron que a Cx43 só estaba presente nos exosomas derivados das células de melanoma con expresión ectópica para a Cx43 (A375-vCx43). Cando se expuxeron diferentes liñas celulares de melanoma á Cx43 exosomal, estas vesículas diminuíron a proliferación celular e o crecemento de colonias. A análise das proteínas presentes nos exosomas das liñas positiva e negativa para a Cx43 mediante espectometría de masas indicou que a Cx43 a nivel exosomal a través da súa función de andamio podería estar implicada no recrutamento de proteínas e outros compostos cara os exosomas, cambiando o seu papel no progreso do melanoma. Unha maior comprensión do papel da Cx43 nos exosomas terá implicacións para o desenvolvemento de novas estratexias terapéuticas para combater a metástase no melanoma.

[Abstract] Loss of gap junction intercellular communication (GJIC) and/or downregulation of connexins (Cxs) have been reported in different cancer types ncluding melanoma. Cxs have been described as tumor suppressors in earlier stages of melanoma. However during tumor cell invasion and metastasis their role is still controversial. Extracellular vesicles (EVs) and exosomes released by cells participate in cell communication and can be involved in tumor progression. The transmembrane protein connexin43 (Cx43) was found in exosomas and participate in the transfer of information to the target cell though gap junctions (GJs). The aim of this work was to study the role of the Cx43 in exosomas in melanoma progression. Cx43 was only present in exosomes derived from melanoma cells expressing ectopic Cx43 (A375-vCx43). When different melanoma cell lines were exposed to exosomal Cx43, these vesicles decreased cell proliferation and blocked colonies grown. The analysis of protein content of the exosomes positive and negative for Cx43 was carried out by mass spectrometry. Our results indicated that exosomal Cx43 through its scaffolding function may be involved in the recruitment of proteins and other molecules to the exosomes switching the role of these EVs in melanoma progression. Further understanding of the role of Cx43 in the exosomes will have important implications in order to combat metastasis in melanoma.