Desarrollo metodológico para un estudio farmacogenético de los polimorfismos de los genes HCN4 y CYP3A4 y su efecto en la respuesta a la ivabradina en pacientes con insuficiencia cardíaca

Abstract

Introducción: La frecuencia cardiaca (FC) elevada en reposo es un factor de riesgo alto en pacientes con insuficiencia cardiaca y su control es una estrategia terapéutica en estos pacientes, en especial tras los estudios realizados con Ivabradina. La Ivabradina es un fármaco bradicardizante selectivo que inhibe la corriente If en el nódulo sinoauricular. Dos proteínas fundamentales en el efecto de la Ivabradina son el canal HCN4, codificado por el gen HCN4, por ser su diana farmacológica y el citocromo P450 isoforma 3A4 por ser la principal enzima que la metaboliza. A la vista de lo anterior, planteamos la hipótesis de que pueden existir variantes en las secuencias de estos genes que tengan algún efecto sobre la FC en los pacientes tratados con Ivabradina. Como fase preliminar para el desarrollo de esta hipótesis este estudio se plantea el desarrollo de la metodología que permita identificar variantes genéticas en los genes mencionados. Objetivos: Desarrollo de metodología para el análisis genético de HCN4 y de tres SNPs del gen CYP3A4. Métodos: Los métodos empleados incluyeron: diseño de cebadores específicos para los genes HCN4 y CYP3A4, optimización de condiciones de PCRs y de la reacción de secuenciación y análisis de las secuencias obtenidas. Para los pasos anteriores se han usado muestras de 11 pacientes en tratamiento con Ivabradina. Resultados: En el análisis de la secuenciación de todos los exones codificantes del gen HCN4 se han identificado las siguientes variantes sinónimas: L12L g1030C>G (rs201193660), L520L g39660C>T (rs12909882), P852P g45728G>C (rs117819825) y P1200P g46772A>G (rs529004). En relación con los 3 polimorfismos de CYP3A4 estudiados (*1B, *22 y *1G), se identificaron variaciones genotípicas en CYP3A4*1G (20% presentan la variante en heterocigosis). Conclusiones: La metodología desarrollada ha permitido la identificación de polimorfismos en ambos genes. La metodología desarrollada posibilita el estudio farmacogenético de respuesta a la Ivabradina en nuestro entorno que evalúe la relevancia funcional de estos polimorfismos.