Nuevas sondas luminiscentes para la detección de patógenos

Abstract

[Resumen] Pseudomonas aeruginosa constituye un factor de riesgo para los seres humanos, al considerarse una de las bacterias responsables de gran parte de las infecciones que los enfermos adquieren en los hospitales, provocando en algunos casos efectos muy perjudiciales en la salud del paciente. En este trabajo se ha desarrollado un sensor para detectar y monitorizar el enzima Elastasa B, un enzima que la bacteria Pseudomonas aeruginosa segrega al medio celular, y que por tanto permitiría detectar la bacteria. El sensor está formado por un complejo macrocíclico de Tb(III) luminiscente unido a un péptido que contiene la secuencia consenso que corta el enzima. La síntesis del péptido se ha llevado a cabo mediante síntesis manual en fase sólida, mientras que el macrociclo es un derivado del DO3A. El funcionamiento de la sonda se basa en que la antena necesaria para transferir la energía al Tb(III), y que se produzca la emisión de luminiscencia por parte del metal, se encuentra separada del complejo metálico por la secuencia de reconocimiento del enzima, de tal modo que la ruptura de la secuencia peptídica por parte del enzima conlleva a una disminución de la luminiscencia.

[Abstract] Pseudomonas aeruginosa constitutes a risk for humans, as it is considered one of the bacteria responsible for a large part of the hospital infections, in some cases causing very harmful effects on the patient’s health. In this work, a sensor has been developed to detect and monitor the enzyme Elastase B, an enzyme secreted by Pseudomonas aeruginosa into the cellular environment, that would therefore allow the detection of the bacterium. The sensor consists of a luminescent Tb(III) macrocyclic complex linked to a peptide containing the consensus sequence that cleaves the enzyme. The synthesis of the peptide has been carried out by manual solid-phase synthesis, while the macrocycle is a derivative of DO3A. The sensing mechanism of the probe relies on the fact that the antenna necessary to transfer the energy to the Tb (III) ion, and for the luminescence emission of the metal, is separated from the metal complex by the enzyme binding sequence, so that the cleavage of the peptide sequence by the enzyme leads to a decrease in luminescence.

[Resumo] Pseudomonas aeruginosa constitue un risco para os seres humanos, ó considerarse unha das bacterias responsables de gran parte das infeccións que os enfermos adquiren nos hospitais, provocando nalgúns casos efectos moi perxudiciais para a saude do paciente. Neste traballo desarrollouse un sensor para detectar e monitorizar o enzima Elastasa B, un enzima que a bacteria Pseudomonas aeruginosa segrega ao medio celular, e que polo tanto permitiría detectar a bacteria. O sensor está formado por un complexo macrocíclico de Tb(III) luminiscente unido a un péptido que contén a secuencia consenso que corta o enzima. A síntesis do péptido levóuse a cabo mediante síntesis manual en fase sólida, mentres que o macrociclo é un derivado do DO3A. O funcionamento da sonda básase en que a antena necesaria para transferir a enerxía ao Tb(III) e que se produza a emisión de luminiscencia por parte do metal, encóntrase separada do complexo metálico pola secuencia de reconoñecento do enzima, de tal modo que a ruptura da secuencia peptídica por parte do enzima provoca unha disminución da luminiscencia.