Diseño y síntesis de una sonda fluorescente basada en el sideróforo amonabactina de la bacteria patógena "Aeromonas salmonicida" subsp. "salmonicida"

Abstract

[Resumen]: La industria acuícola está siendo enormemente afectada por la aparición y propagación de enfermedades infecciosas en los peces y la elevada resistencia de las bacterias que las provocan a los antibióticos actuales. Por tanto, surge la necesidad de profundizar en el estudio de esas enfermedades infecciosas con el fin de desarrollar nuevos fármacos más efectivos. En este trabajo se propuso la síntesis de una sonda fluorescente (conjugado sideróforo-fluoróforo) para el posterior estudio de su internalización dentro de la bacteria y la monitorización de la forunculosis provocada por Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida. El sideróforo seleccionado como vector de entrada en la bacteria es un análogo de amonabactinas responsable de la captación de Fe(III) de la bacteria patógena A. salmonicida, siendo el fluoróforo la sulforodamina B. El espaciador utilizado para conectar el sideróforo y el fluoróforo fue PEG2, distinto al empleado en estudios previos. El trabajo realizado permitió la obtención de un conjugado entre el sideróforo convenientemente protegido y el fluoróforo, la sulforodamina B, que fue caracterizado tanto por RMN como por espectrometría de masas. La eliminación de los grupos protectores del conjugado obtenido permitirá obtener la sonda fluorescente deseada.

[Resumo]: A industria acuícola está sendo enormemente afectada pola aparición e propagación de enfermidades infecciosas nos peixes e a elevada resistencia das bacterias que as provocan aos antibióticos actuais. Por tanto, surxe a necesidade de profundizar no estudo desas enfermidades infecciosas co fin de desenvolver novos fármacos máis efectivos. Neste traballo propúxose a síntese dunha sonda fluorescente (conxugado sideróforo-fluoróforo) para o posterior estudo da súa internalización dentro da bacteria e a monitorización da forunculosis provocada por Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida. O sideróforo seleccionado como vector de entrada na bacteria é un análogo de amonabactinas responsable da captación de Fe(III) da bacteria patóxena A. salmonicida, sendo o fluoróforo a sulforodamina B. O espaciador utilizado para conectar o sideróforo e o fluoróforo foi PEG2, distinto ao empregado en estudos previos. O traballo realizado permitiu a obtención dun conxugado entre o sideróforo convenientemente protexido e o fluoróforo, a sulfordamina B, que foi caracterizado tanto por RMN coma por espectrometría de masas. A eliminación dos grupos protectores do conxugado obtido permitirá obter a sonda fluorescente desexada.

[Abstract]: The aquaculture industry is being severely affected by the emergence and spread of infectious diseases in fish and the high resistance of bacteria that cause them to current antibiotics. Therefore, there is a need to deepen the study of these infectious diseases in order to develop new and more effective drugs. In this work, the synthesis of a fluorescent probe (siderophore-fluorophore conjugate) was proposed for the subsequent study of its internalization within the bacterium and the monitoring of forunculosis caused by Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida. The siderophore selected as an input vector in the bacterium is an analog of the amonabactins, which are involved in the uptake of Fe(III) by the pathogenic bacterium A. salmonicida and the fluorophore is sulforodamine B. The spacer used to connect the siderophore and the fluorophore was PEG2, different from the one used in previous studies. This work allowed to obtain a conjugate between the suitably protected siderophore and fluorophore, the sulforhodamine B, which was characterized by both NMR and mass spectrometry. The elimination of the protecting groups of the obtained conjugate will allow obtaining the desired fluorescent probe.