Implicación de la familia de miARNs miR-200 en la adipogénesis
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Implicación de la familia de miARNs miR-200 en la adipogénesisAutor(es)
Directores
Sangiao-Alvarellos, SusanaFecha
2021-07Centro/Dpto/Entidad
Universidade da Coruña. Facultade de Ciencias da SaúdeDescripción
Traballo fin de mestrado (UDC.FCS). Asistencia e investigación sanitaria. Especialidade en Fundamentos de investigación biomédica. Curso 2020-2021Resumen
[Resumen] Los microARNs (miARNs) son pequeños ARNs endógenos de 18-24
nucleótidos, no codificantes y que tienen la capacidad de silenciar el ARNm
regulando transcripcionalmente la expresión génica. Durante las últimas
décadas, las tasas de obesidad se han incrementado en todo el mundo, no
siendo España una excepción. En la obesidad, el proceso de adipogénesis
determina en gran medida el número de adipocitos en los depósitos de
grasa corporal. En este trabajo se estudió la implicación de la familia miR-
200 en la adipogénesis y la ruta de la señalización de la insulina. Para ello,
se usó la línea celular 3T3-L1 tratada previamente con factores lentivirales
para sobreexpresar miR-141 y miR-200c e inhibir miR-200b.
Posteriormente se indujo la adipogénesis y se observó su diferenciación
durante siete días. Se cuantificó la cantidad de triglicéridos gracias a una
tinción de Oil Red-O y se analizó la expresión proteica de proteínas clave
de la ruta de señalización de la insulina y de la lipogénesis de novo. Los
resultados muestran que altos niveles de miR-141 y miR-200c disminuyen
el número de adipocitos maduros y la cantidad de triglicéridos, mientras que
la inhibición de miR-200b provoca el efecto contrario. La sobreexpresión de
miR-141 y miR-200c provoca que no se produzcan aumentos
estadísticamente significativos en pAKT tras el tratamiento con insulina,
efecto contrario al producido al inhibir miR-200b.
En base a estos datos se puede concluir que la sobreexpresión de miR-141
y miR-200c produce una inhibición de la adipogénesis y un empeoramiento
en la ruta de señalización de la insulina y, por el contrario, la inhibición de
miR-200b provoca una estimulación de la adipogénesis y un aumento de la
sensibilidad a la insulina, sugiriendo una implicación de la familia miR-200
en ambas rutas. [Resumo] Os microARNs (miARNs) son pequenos ARNs endóxenos de 18-24
nucleótidos, non codificantes e que teñen a capacidade de silenciar o
ARNm regulando transcripcionalmente a expresión xénica. Durante as
últimas décadas, as taxas de obesidade incrementáronse en todo o mundo,
non sendo España unha excepción. Na obesidade, o proceso de
adipoxénese determina en gran medida o número de adipocitos nos
depósitos de graxa corporal. Neste traballo estudouse a implicación da
familia miR-200 na adipoxénese e a ruta de sinalización da insulina. Para
elo, usouse a liña celular 3T3-L1 tratada previamente con factores
lentivirais para sobreexpresar miR-141 e miR-200c e inhibir miR-200b.
Posteriormente induciuse a adipoxénese e observouse a súa diferenciación
durante sete días. Cuantificouse a cantidade de triglicéridos grazas a unha
tinguidura de Oil Red-O e analizouse a expresión proteica de proteínas
clave da ruta de sinalización da insulina e da lipoxénese de novo. Os
resultados mostran que altos niveis de miR-141 e miR-200c diminúen o
número de adipocitos maduros e a cantidade de triglicéridos, mentres que
a inhibición de miR-200b provoca o efecto contrario. A sobreexpresión de
miR-141 e miR-200c provoca que non se produzan aumentos
estatisticamente significativos en pAKT tralo tratamento con insulina, efecto
contrario ao producido ao inhibir miR-200b.
En base a estes datos pódese concluír que a sobreexpresión de miR-141
e miR-200c produce unha inhibición da adipoxénese e un empeoramento
na ruta de sinalización da insulina e, polo contrario, a inhibición de miR-
200b provoca unha estimulación da adipoxénese e un aumento da
sensibilidade á insulina, suxerindo unha implicación da familia miR-200 en
ambas rutas. [Abstract] MicroARNs (miARNs) are endogeneous small noncoding RNAs of 18-24
nucleotides, that have the capability to silence ARNm by genic expression
transcriptionally regulation. During last decades, obesity rates have growth
worldwide, not being Spain an exception. In obesity, adipogenesis process
determines largely the adipocytes number in body fat depots. In this work
the implication of miR-200 family in adipogenesis and the insulin signalizing
pathway were studied. For this, 3T3-L1 cell line previously treated with
lentiviral factors to overexpress miR-141 and miR-200c and to inhibit miR-
200b was used. Afterwards adipogenesis was inducted and its
differentiation was followed for seven days. The amount of triglycerides was
quantified by Oil Red-O stain and the protein expression of key proteins in
insulin signalizing pathway and lipogenesis de novo was analyzed. Results
show that high levels of miR-141 and miR-200c decrease the number of
mature adipocytes and triglycerides quantity, while the inhibition of miR-
200b causes the opposite effect. The overexpression of miR-141 y miR-
200c causes no statistically significant increases in pAKT to occur after
treatment with insulin, the opposite effect to that produced by inhibiting miR-
200b.
Based on these data it can be concluded that miR-141 and miR-200c
overexpression produces an adipogenesis inhibition and a worsening of
insulin signaling pathway and, on the contrary, miR-200b inhibition causes
an adipogenesis stimulation and an insulin sensitivity increase, suggesting
and implication of miR-200 family in both pathways.
Derechos
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