Estudio de la capacidad de diferenciación condrogénica de células madre mesenquimales inmortalizadas cultivadas en dos tipos de biomateriales

Abstract

[Resumen] Este estudio se ha centrado en evaluar la capacidad condrogénica de una línea celular inmortalizada tras ser cultivada en dos tipos diferentes de biomateriales (criogel de ácido hialurónico y esponja de colágeno) en presencia de diferentes medios de diferenciación condrogénico. Para ello, se descongelaron células madre mesenquimales inmortalizadas provenientes de una línea celular generada en previos estudios del grupo (127TT iMSCs), se cultivaron, expandieron y se sembraron sobre los biomateriales con dos medios de diferenciación condrogénica diferentes. Al cabo de 21 días se realizaron análisis histomorfológicos y de expresión génica para verificar el crecimiento y diferenciación condrogénica de las células. Los resultados del análisis histomorfológico de las esponjas de colágeno revelaron una adherencia de la línea 127TT iMSC a la superficie del biomaterial, proliferación y cierto grado de diferenciación condrogénica y síntesis de matriz extracelular. Sin embargo, los resultados del análisis de la expresión génica no fueron tan esclarecedores. Se puede concluir que el tamaño de poro y / o composición del criogel de ácido hialurónico no permitió la adherencia de la línea 127TT iMSC a la superficie del biomaterial. La esponja de colágeno sí lo permitió, pero futuros estudios y optimizaciones de protocolo serán necesarios para la determinación mediante análisis de la expresión génica de la existencia de una diferenciación condrogénica y síntesis de matriz extracelular.

[Resumo] Este estudo centrouse na avaliación da capacidade condroxénica dunha liña celular inmortalizada despois de ser cultivada en dous tipos diferentes de biomateriais (crioxel de ácido hialurónico e esponxa de coláxeno) en presenza de diferentes medios de diferenciación condroxénicos. Para iso, as células nai mesenquimais inmortalizadas a partir dunha liña celular xerada en estudos previos do grupo (127TT iMSC) foron desconxeladas, cultivadas, expandidas e sementadas nos biomateriais con dous medios de diferenciación condroxénicos diferentes. Despois de 21 días, realizáronse análises histomorfolóxicas e de expresión xénica para verificar o crecemento e a diferenciación condroxénica das células. Os resultados da análise histomorfolóxica das esponxas de coláxeno revelaron unha adherencia da liña 127TT iMSC á superficie do biomaterial, proliferación e un certo grao de diferenciación condroxénica e síntese de matriz extracelular. Porén, os resultados da análise da expresión xénica non foron tan iluminadores. Pódese concluír que o tamaño dos poros e / ou a composición do crioxel do ácido hialurónico non permitiu a adherencia da liña 127TT iMSC á superficie do biomaterial. A esponxa de coláxeno si o permitiu, pero serán necesarios futuros estudos e optimizacións de protocolos para a determinación mediante a análise da expresión xénica da existencia de diferenciación condroxénica e síntese de matriz extracelular.

[Abstract] This study has focused on evaluating the chondrogenic capacity of an immortalized cell line after being cultured in two different types of biomaterials (hyaluronic acid cryogel and collagen sponge) in the presence of different chondrogenic differentiation media. For this, immortalized mesenchymal stem cells from a cell line generated in previous studies of the group (127TT iMSCs) were thawed, cultured, expanded and seeded on the biomaterials with two different chondrogenic differentiation media. After 21 days, histomorphological and gene expression analyses were performed to verify the growth and chondrogenic differentiation of the cells. The results of the histomorphological analysis of the collagen sponges revealed both adherence to the surface of the biomaterial, and proliferation with a certain degree of chondrogenic differentiation and extracellular matrix synthesis of the 127TT iMSC line. However, the results of the gene expression analysis were not so revealing. It can be concluded that the pore size and / or composition of the hyaluronic acid cryogel did not allow the adherence of the 127TT iMSC line to the surface of the biomaterial. The collagen sponge did allow it, but future studies and protocol optimizations will be necessary to conclude by gene expression analysis the existence of chondrogenic differentiation and extracellular matrix synthesis.