Preparación de conjugados moleculares basados en el sideróforo amonabactina de la bacteria patógena Aeromonas salmonicida

Abstract

[Resumen] La aparición y propagación de resistencias frente a los agentes antimicrobianos se ha visto acelerada en los últimos años, provocando una crisis sanitaria a nivel mundial y poniendo de manifiesto la necesidad urgente de desarrollar fármacos nuevos más efectivos. En el presente trabajo se planteó el desarrollo sintético de un conjugado sideróforo-antibiótico siguiendo una estrategia tipo “caballo de Troya”, así como la construcción de una sonda fluorescente para estudiar los mecanismos implicados en los procesos de reconocimiento e internalización, empleando en ambos casos un espaciador de mayor longitud al utilizado en estudios previos. El vector de entrada seleccionado fue un análogo de las amonabactinas, un sideróforo de la bacteria patógena Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida con el que se pretendía aprovechar el mecanismo de captación de hierro para promover la absorción activa del antibiótico (ampicilina) y el fluoróforo (sulforodamina B). El trabajo desarrollado permitió la obtención de un conjugado sideróforo-antibiótico, sin embargo, su caracterización evidenció la presencia de otros compuestos que indicaron la posible degradación del producto. Estos resultados muestran la necesidad de realizar nuevos ensayos que permitan obtenerlo con mayor grado de pureza. Además, se consiguió la funcionalización del espaciador con los grupos reactivos necesarios para formar la sonda fluorescente, pero el acoplamiento con la sulforodamina B no dio los resultados esperados.

[Resumo] A aparición e propagación de resistencias fronte os axentes antimicrobianos viuse acelerada nos últimos anos, provocando una crise sanitaria a nivel mundial e poñendo de manifesto a necesidade urxente de desenvolver novos fármacos mais efectivos. No presente traballo propúxose o desenvolvemento sintético dun conxugado sideróforoantibiótico seguindo unha estratexia tipo “cabalo de Troia”, así como a construción dunha sonda fluorescente para estudar os mecanismos implicados nos procesos de recoñecemento e internalización, empregando en ambos casos un espaciador de maior lonxitude ao utilizado en estudos previos. O vector de entrada seleccionado foi un análogo das amonabactinas, un sideróforo da bacteria patóxena Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida co que se pretendía aproveitar o mecanismo de captación de ferro para promover a absorción activa do antibiótico (ampicilina) e o fluoróforo (sulforodamina B). O traballo desenvolto permitiu a obtención dun conxugado sideróforo-antibiótico, non obstante, a súa caracterización evidenciou a presencia doutros compostos que indicaron a posible degradación do produto. Estes resultados mostraron a necesidade de realizar novos ensaios que permitan a súa obtención cun maior grado de pureza. Ademais, conseguiuse a funcionalización do espazador cos grupos reactivos necesarios para formar a sonda fluorescente, pero o acoplamento coa sulforodamina B non deu os resultados esperados.

[Abstract] The emergence and spread of resistance to antimicrobial agents has accelerated in recent years, causing a global health crisis and highlighting the urgent need to develop more effective new drugs. In the present work, the synthetic development of a siderophoreantibiotic conjugate following a “Trojan Horse” strategy was proposed, as well as the construction of a fluorescent probe to study the mechanisms involved in the recognition and internalization processes, using in both cases a linker longer than that used in previous studies. The selected entry vector was an analog of amonabactins, a siderophore of the pathogenic bacterium Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida with which it was intended to take advantage of the iron uptake mechanism to promote the active absorption of the antibiotic (ampicillin) and the fluorophore (sulforhodamine B). The work carried out allowed the obtaining of a siderophore-antibiotic conjugate, however, its characterization showed the presence of other compounds that indicated the possible degradation of the product. These results show the need for new studies to obtain it with a higher degree of purity. Furthermore, functionalization of the spacer with the necessary reactive groups to form the fluorescent probe was achieved, but coupling with sulforhodamine B did not give the expected results.