Estudio sobre recombinación homóloga y el Complejo del Poro Nuclear

Abstract

[Resumen]: Además de su papel en el tráfico de moléculas núcleo-citoplasma, el Complejo del Poro Nuclear (NPC), desempeña un papel fundamental en procesos nucleolares como la elongación transcripcional y la recombinación, viéndose afectada por el sub-complejo Nup84 (complejo Y). Estudios previos de nuestro laboratorio en S. cerevisiae, han analizado el papel que desempeñan las regiones 3´-UTR en el proceso de recombinación entre dos secuencias de GFP: el expresado en un plásmido y con localización citosólica y el genómico, por la fusión RPA190-GFP, que permite obtener un GFP de localización nucleolar. En el presente trabajo se ha puesto a punto la metodología para el estudio, mediante técnicas de PCR, de cambios en la abundancia relativa de GFP y RPA190-GFP en una cepa silvestre y otra mutante para el factor Nup84. Nuestros datos indican que esta recombinación varía en ambas cepas y también depende de la región 3´-UTR del GFP plasmídico.

[Resumo]: Ademáis do seu papel no tráfico de moléculas núcleo-citoplasma, o Complexo do Poro Nuclear (NPC), desenvolve un papel fundamental en procesos nucleolares como a elongación transcripcional e a recombinación, véndose afectada polo sub-complexo Nup84 (complexo Y). Estudos previos do noso laboratorio en S. cerevisiae, analizaron o papel que desenvolve as rexións 3´-UTR no proceso de recombinación entre dúas secuencias de GFP: o expresado nun plásmido e con localización citosólica e o xenómico, pola fusión RPA190-GFP, que permite obter un GFP de localización nucleolar. No presente traballo se puxeron a punto a metodoloxía para o estudo, mediante técnicas de PCR, de cambios na abundancia relativa de GFP e RPA19-GFP0 nunha cepa silvestre e noutra mutante para o factor Nup84. Os nosos datos indican que esta recombinación varía en ambas cepas e tamén depende da rexión 3´-UTR do GFP plasmídico.

[Abstract]:In adittion to its role in the molecular trafficking between nucleus and cytoplasm, the Nuclear Pore Complex (NPC) plays an essential role in nuclear processes such as transcripcional elongation and recombination, being affected by the Nup84 sub-complex (Y complex). Previous studies in our laboratory in S. cerevisiae, analyzed the role of the 3´-UTR regions in the recombination process between two sequences: the one expressed from a plasmid, with cytosolic localization, and the genomic one, the RPA190-GFP fusion, producing a nucleolar localization of GFP. In the present work, we have adapted the methodology to study changes in the relative abundance of GFP and RPA190- GFP, using PCR techniques, in a wild strain and another mutant for the NUp84 factor. Our data indicate that this recombination changes in both strains and also depends on the 3´-UTR region of the plasmid.