El papel de RORα en la adipogénesis

Abstract

[Resumen] La obesidad es una enfermedad que está asociada a la progresión de diversas patologías crónicas como la Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2). Los procesos de hipertrofia e hiperplasia de los adipocitos se encuentran implicados en el desarrollo de la misma. Actualmente, no se encuentran completamente esclarecidos los mecanismos por los cuales se lleva a cabo la proliferación y diferenciación adipocitaria, denominada adipogénesis. La epigenética cumple un rol fundamental, y dentro de ella numerosos microARNs (miRs) participan en la regulación del metabolismo de la glucosa y lípidos. Entre los procesos que podrían regular la adipogénesis se encuentra el Receptor Huérfano alfa relacionado con el Ácido Retinoico (RORα), que según distintos modelos bioinformáticos podría encontrar regulada su expresión a través de miR-19b. Sin embargo, el rol que cumple RORα en la diferenciación adipocitaria es controvertido. Si bien hay autores que indican que su papel sobre la adipogénesis es negativo, otros afirman lo contrario. En este trabajo nos propusimos estudiar el rol de RORα en la adipogénesis y comprobar si dicho receptor nuclear es una diana de miR-19b. Células 3T3-L1 estimuladas con un cóctel proadipogénico fueron tratadas con distintas concentraciones de SR1078 (agonista de RORα) Posteriormente, se evaluó la expresión génica mediante RT-qPCR de factores proadipogénicos, marcadores de adipocitos maduros y enzimas de la glucólisis y de la β-oxidación. En conclusión, demostramos que RORα posee un efecto positivo sobre la regulación de la adipogénesis ya que se observó un aumento del depósito de lípidos intracelular. Sin embargo, son necesarios más estudios para poder explicar el mecanismo por el cual ejerce este efecto. Finalmente, no pudimos comprobar si RORα es una diana de miR-19b por fallos en la técnica.

[Resumo] A obesidade é unha enfermidade asociada á progresión de diversas patoloxías crónicas como a Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2). Os procesos de hipertrofia e hiperplasia adipocitaria atópanse implicados no desenvolvemento da mesma. Actualmente, non están completamente esclarecidos os mecanismos polos cales se leva a cabo a proliferación e diferenciación adipocitaria, denominada adipoxénese. A epixenética cumpre un rol fundamental, e dentro dela numerosos microARNs (miRs) participan na regulación do metabolismo da glicosa e lípidos. Entre os procesos que poderían regular a adipoxénese atópase o Receptor Orfo alfa relacionado co Ácido Retinoico (RORα), que segundo distintos modelos bioinformáticos podería ter regulada a súa expresión a través de miR-19b. Con todo, o rol que cumpre RORα na diferenciación adipocitaria é controvertido. Aínda que hai autores que indican que o seu papel sobre a adipoxénese é negativo, outros afirman o contrario. Neste traballo propuxémonos estudar o rol de RORα na adipoxénese e comprobar se devandito receptor nuclear é unha diana de miR-19b. Células 3T3-L1 estimuladas cun cóctel proadipoxénico tratáronse con distintas concentracións de SR1078 (agonista de RORα). Posteriormente, avaliouse a expresión xénica mediante RT-qPCR de factores proadipoxénicos, marcadores de adipocitos maduros e encimas da glucólise e da β-oxidación. En conclusión, demostramos que RORα posúe un efecto positivo sobre a regulación da adipoxénese xa que se observou un aumento do depósito de lípidos intracelulares. Con todo, son necesarios máis estudos para poder explicar o mecanismo polo cal exerce este efecto. Finalmente, non puidemos comprobar se RORα é unha diana de miR-19b por fallos na técnica.

[Abstract] Obesity is an illness that is associated with the progression of diverse kind of chronic diseases such as type 2 Diabetes Mellitus (T2DM). Adipocyte´s hypertrophy and hyperplasia processes are implicated in its growth. Currently, the mechanisms whereby proliferation and adipocyte differentiation, known as adipogenesis, take place are not completely elucidated. Epigenetics plays a fundamental role, and within it, numerous microRNAs (miRs) are involved in the regulation of glucose and lipid metabolism. The Retinoic Acid related Orphan Receptor alpha (RORα) is among the processes that could regulate adipogenesis, which according to diverse bioinformatics models its expression could be regulated by miR-19b. However, the role of RORα in adipocyte differentiation is controversial. While there are authors who argue that its role on adipogenesis is negative, others claim the opposite. The aim of this project was to study the role of RORα in adipogenesis and verify whether this nuclear receptor is a target of miR-19b. 3T3-L1 cells stimulated with a proadipogenic coctel were treated with different concentrations of SR1078 (RORα agonist). Later on, the genic expression of proadipogenic factors, adipocyte maturity markers, glycolytic and β-oxidation pathways enzymes were evaluated with RT-qPCR. In conclusion, we proved that RORα has a positive effect on the regulation of adipogenesis because we observed an increase of the intracellular lipid deposits. Nevertheless, more tests are needed to be able to explain the mechanism by which it exerts this effect. Finally, we could not verify if RORα is a target of miR-19b due to flaws in the technique.