Evaluación de la regeneración axonal y de la recuperación funcional tras la inyección intraneural de factor de crecimiento insulínico tipo I en isoinjertos nerviosos criopreservados en el modelo de defecto ciático de rata

Abstract

[Resumen] Objetivo Establecer un protocolo de criopreservación nerviosa, e investigar el efecto del IGF-1 (Factor de crecimiento insulínico I) intraneural en los isoinjertos criopreservados. Material y métodos Se compararon dos protocolos de criopreservación: Dimetilsulfóxido (DMSO) y DMSO con albúmina humana. La evaluación estructural se realizó a través de análisis histológicos. La viabilidad se valoró mediante la prueba calceína AM (CAM) - 4',6- diamino-2-fenilindol (DAPI). Para evaluar el efecto del IGF-1, 57 ratas se dividieron aleatoriamente en tres grupos: (1) autoinjerto; (2) isoinjerto criopreservado; (3) isoinjerto criopreservado con administración intraneural de IGF-1. 12 semanas tras la cirugía, se evaluaron la recuperación funcional (Walking track, estudio electrofisiológico, índice del músculo gastrocnemio (GMI)) y la regeneración nerviosa (histomorfometría). XX Resultados La arquitectura nerviosa se preservó correctamente tras la criopreservación. La viabilidad celular fue significativamente superior en el grupo con albúmina. En el estudio prospectivo, los resultados funcionales e histológicos revelaron mejoría significativa de los parámetros con la adición del factor de crecimiento respecto a los resultados del isoinjerto solo. Conclusiones La viabilidad se incrementó significativamente añadiendo albúmina al proceso de criopreservación. La inyección intraneural de IGF-1 mejoró significativamente la regeneración axonal y la recuperación funcional, consiguiendo resultados comparables a los del autoinjerto.

[Resumo] Obxectivo Establecer un protocolo de criopreservación nerviosa, e investigar o efecto do IGF-1 (Factor de crecemento insulínico I) intraneural nos isoenxertos criopreservados. Material e métodos Comparáronse dous protocolos de criopreservación: Dimetilsulfóxido (DMSO) e DMSO con albúmina humana. A avaliación estrutural realizouse a través da análise histolóxica. A viabilidade valorouse mediante a proba calceína AM (CAM) - 4',6-diamino- 2-fenilindol (DAPI). Para avaliar o efecto do IGF-1, 57 ratas dividíronse aleatoriamente en tres grupos: (1) autoenxerto; (2) isoenxerto criopreservado; (3) isoenxerto criopreservado con administración intraneural de IGF-1. 12 semanas trala ciruxía, avaliáronse a recuperación funcional (Walking track, estudo electrofisiolóxico, índice do músculo gastrocnemio (GMI)) e a rexeneración nerviosa (histomorfometría). XXII Resultados A arquitectura nerviosa preservouse correctamente trala criopreservación. A viabilidade celular foi significativamente superior no grupo con albúmina. No estudo prospectivo, os resultados funcionais e histolóxicos revelaron melloría significativa dos parámetros coa adición do factor de crecemento respecto aos resultados do isoenxerto só. Conclusións A viabilidade incrementouse significativamente engadindo albúmina ao proceso de criopreservación. A inxección intraneural de IGF-1 mellorou significativamente a rexeneración axonal e a recuperación funcional, conseguindo resultados comparables aos do autoenxerto.

[Abstract] Purpose Establishing a nerve cryopreservation protocol, and investigating intraneural IGF-1 (Insulin-like growth factor I) effect in cryopreserved isografts. Material and methods Two cryopreservation protocols were compared: Dimethyl sulfoxide (DMSO) and DMSO with human albumin. The structural evaluation was performed through histological analysis. The viability was assessed with calcein AM (CAM) - 4',6-diamidino-2- phenylindole (DAPI). In order to evaluate the effect of IGF-1, 57 rats were randomly divided into three groups: (1) autograft; (2) cryopreserved isograft; (3) cryopreserved isograft with intraneural IGF-1. 12 weeks after surgery, the functional recovery (Walking track, electrophysiology studies, gastrocnemius mass index (GMI)) and nerve regeneration (histomorphometry) were assessed. XXIV Results Nerve architecture was correctly preserved after cryopreservation. Cell viability was significantly higher in the group with albumin. In the prospective study, functional and histological results revealed significant improvement of the variables after the addition of the growth factor as compared to isograft alone. Conclusions The viability was significantly increased when albumin was added to the cryopreservation protocol. Intraneural injection of IGF-1 significantly improved axonal regeneration and functional recovery, achieving results comparable to those of the autograft.