Diseño metodológico de la detección de ADN bacteriano a partir de trombos procedentes de pacientes con infarto agudo de miocardio

Abstract

[Resumen] Introducción: El accidente de la placa aterosclerótica, consistente en la ruptura, erosión o disección que resulta en la formación de un trombo intraluminal en una o más arterias coronarias que dando lugar al Infarto Agudo de Miocardio (IAM). El tratamiento indicado en este contexto es la reperfusión urgente, fundamentalmente la de tipo mecánica como la angioplastia primaria. Se han identificado múltiples factores posibles predictores de los diferentes síndromes coronarios agudos pero los mecanismos moleculares y celulares implicados en la oclusión trombótica en el IAM no son totalmente conocidos. Por este motivo en los últimos años se ha planteado la hipótesis de que la infección crónica puede desempeñar un papel importante en el desarrollo de la aterosclerosis, ya que se han hallado diversos microorganismos presentes en los trombos de pacientes con IAM. Objetivos: Diseñar el método para la detección de ADN bacteriano a partir de trombos procedentes de pacientes con IAM. Métodos: Los métodos incluyeron la utilización de dos kits de extracción de ADN para trombos el NucleoSpin® Blood y el QuickPure illustraTM DNA Extraction kit BACC3 y de un tercer kit para la extracción de ADN de las muestras de sangre, el kitGentra® Puregene®. Resultados: Con el kit NucleoSpin® Blood las concentraciones eran altas pero ninguna de buena calidad. Con el kit QuickPure illustraTM DNA Extraction kit BACC3 se analizaron dos muestras siguiendo el protocolo específico para tejidos, ambas muestras daban concentraciones de ADN bajas y con una calidad pobre. Con el protocolo específico para sangre y cultivos celulares de este mismo kit se analizaron 124muestras. Conclusiones: El mejor kit para la extracción de ADN procedente de trombos de pacientes con IAM es el Kit de illustraTM DNA Extraction kit BACC3. El protocolo con mejores resultados es el protocolo para BACC1 para volúmenes pequeños de sangre (50μL-1mL) y 1x106 a 3x106 de cultivos celulares. Realizar una optimización de los protocolos, en este caso de extracción de ADN es fundamental para llevar a cabo un proyecto de investigación. Es importante realizar un estudio para confirmar la presencia de microorganismos en el trombo coronario ya que de demostrarse esta teoría se podría mejorar la terapéutica del IAM.