Caracterización funcional de SKY1 y su papel en la resistencia de las levaduras a cisplatino

Abstract

[Resumo] O cisplatino é un fármaco anticanceríxeno que contén platino na súa estructura. Actúa inhibindo a multiplicación das células tumorais. Forma unions na dobre hélice de ADN, o que provoca interferenzas importantes nos procesos de división do ADN, e en consecuencia, a morte. Identificáronse varios xenes en Saccharomyces cerevisiae cuya inactivación produce resistencia ó cisplatino. Entre eles SKY1, que codifica para unha proteín-quinasa SR cun papel potencial na señalización celular, e IXR1 que codifica unha proteína de unión ao ADN con conexions na reparación do ADN. Neste studio analizamos os fenotipos asociados ás delecions sinxelas ?sky1 y ?ixr1, e a dobre ?sky1?ixr1 para averiguar as interaccións xenéticas que se producen entre os dous xenes, comprobando que é dependente de cepa. Tamén analizamos qué parte da resposta ó cisplatino esta mediada por Sky1p y os posibles xenes diana que se ven implicados na desposta ó cisplatino, de forma dependente ou independente de Sky1p mediante análises baseados en técnicas de transcriptómica y proteómica.

[Resumen] El cisplatino es un fármaco anticancerígeno que contiene platino (II) en su estructura. Actúa inhibiendo la multiplicación de las células tumorales. Forma uniones en la doble hélice de ADN, lo que provoca interferencias importantes en los procesos de división del ADN, y en consecuencia, la muerte celular. Se han identificado varios genes en Saccharomyces cerevisiae cuya inactivación produce resistencia a cisplatino. Entre ellos SKY1, que codifica para una proteín-quinasa SR, con un papel potencial en la señalización celular, e IXR1 que codifica una proteína de unión al ADN con conexiones en la reparación del ADN. En este estudio hemos analizado los fenotipos asociados a las deleciones simples ?sky1 y ?ixr1, y la doble ?sky1?ixr1 para averiguar las interacciones genéticas que se producen entre ambos genes, comprobando que es dependiente de cepa. También hemos analizado qué parte de la respuesta a cisplatino está mediada por Sky1p y los posibles genes/proteínas diana que se ven implicados en esta respuesta, de forma dependiente o independiente de Sky1p, mediante análisis basados en técnicas de transcriptómica y proteómica.

[Abstract] Cisplatin is an anticancer drug, which contain platinum (II) in its structure. It acts by inhibiting the multiplication of tumor cells. Form bonds with the DNA double helix, that producing significant interferences to the DNA division processes and, consequently, cell death. Several genes have been identified in Saccharomyces cerevisiae whose inactivation causes resistance to cisplatin. Among them SKY1, that encodes a SR protein kinase with a potential role in cell signaling and IXR1, which encodes a DNA binding protein interfering in DNA repair. We have tested, through simple ?sky1, ?ixr1 and double ?sky1?ixr1 deletions, the genetics interactions between these genes in the production of associated phenotypes, and results show that they are strain-dependent. We have also analyzed the role of Sky1p in the response to cisplatin, and the target genes/proteins that are involved in this response, in a Sky1p-dependent or Sky1p-independent way. Transcriptomic and proteomic techniques have been used in this study.