Evaluación de la regeneración axonal y de la recuperación funcional tras la inyección intraneural de factor de crecimiento insulínico tipo I en isoinjertos nerviosos criopreservados en el modelo de defecto ciático de rata
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http://hdl.handle.net/2183/22891Colecciones
- Teses de doutoramento [2162]
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Evaluación de la regeneración axonal y de la recuperación funcional tras la inyección intraneural de factor de crecimiento insulínico tipo I en isoinjertos nerviosos criopreservados en el modelo de defecto ciático de rataAutor(es)
Directores
Rendal Vázquez, María EstherÁlvarez Jorge, José Ángel
Fecha
2018Centro/Dpto/Entidad
Universidade da Coruña. Departamento de MedicinaResumen
[Resumen]
Objetivo
Establecer un protocolo de criopreservación nerviosa, e investigar el efecto del
IGF-1 (Factor de crecimiento insulínico I) intraneural en los isoinjertos criopreservados.
Material y métodos
Se compararon dos protocolos de criopreservación: Dimetilsulfóxido (DMSO) y
DMSO con albúmina humana. La evaluación estructural se realizó a través de análisis
histológicos. La viabilidad se valoró mediante la prueba calceína AM (CAM) - 4',6-
diamino-2-fenilindol (DAPI).
Para evaluar el efecto del IGF-1, 57 ratas se dividieron aleatoriamente en tres
grupos: (1) autoinjerto; (2) isoinjerto criopreservado; (3) isoinjerto criopreservado con
administración intraneural de IGF-1. 12 semanas tras la cirugía, se evaluaron la
recuperación funcional (Walking track, estudio electrofisiológico, índice del músculo
gastrocnemio (GMI)) y la regeneración nerviosa (histomorfometría).
XX
Resultados
La arquitectura nerviosa se preservó correctamente tras la criopreservación. La
viabilidad celular fue significativamente superior en el grupo con albúmina.
En el estudio prospectivo, los resultados funcionales e histológicos revelaron
mejoría significativa de los parámetros con la adición del factor de crecimiento respecto a
los resultados del isoinjerto solo.
Conclusiones
La viabilidad se incrementó significativamente añadiendo albúmina al proceso de
criopreservación.
La inyección intraneural de IGF-1 mejoró significativamente la regeneración
axonal y la recuperación funcional, consiguiendo resultados comparables a los del
autoinjerto. [Resumo]
Obxectivo
Establecer un protocolo de criopreservación nerviosa, e investigar o efecto do
IGF-1 (Factor de crecemento insulínico I) intraneural nos isoenxertos criopreservados.
Material e métodos
Comparáronse dous protocolos de criopreservación: Dimetilsulfóxido (DMSO) e
DMSO con albúmina humana. A avaliación estrutural realizouse a través da análise
histolóxica. A viabilidade valorouse mediante a proba calceína AM (CAM) - 4',6-diamino-
2-fenilindol (DAPI).
Para avaliar o efecto do IGF-1, 57 ratas dividíronse aleatoriamente en tres grupos:
(1) autoenxerto; (2) isoenxerto criopreservado; (3) isoenxerto criopreservado con
administración intraneural de IGF-1. 12 semanas trala ciruxía, avaliáronse a recuperación
funcional (Walking track, estudo electrofisiolóxico, índice do músculo gastrocnemio
(GMI)) e a rexeneración nerviosa (histomorfometría).
XXII
Resultados
A arquitectura nerviosa preservouse correctamente trala criopreservación. A
viabilidade celular foi significativamente superior no grupo con albúmina.
No estudo prospectivo, os resultados funcionais e histolóxicos revelaron melloría
significativa dos parámetros coa adición do factor de crecemento respecto aos resultados
do isoenxerto só.
Conclusións
A viabilidade incrementouse significativamente engadindo albúmina ao proceso
de criopreservación.
A inxección intraneural de IGF-1 mellorou significativamente a rexeneración
axonal e a recuperación funcional, conseguindo resultados comparables aos do
autoenxerto. [Abstract]
Purpose
Establishing a nerve cryopreservation protocol, and investigating intraneural IGF-1
(Insulin-like growth factor I) effect in cryopreserved isografts.
Material and methods
Two cryopreservation protocols were compared: Dimethyl sulfoxide (DMSO) and
DMSO with human albumin. The structural evaluation was performed through histological
analysis. The viability was assessed with calcein AM (CAM) - 4',6-diamidino-2-
phenylindole (DAPI).
In order to evaluate the effect of IGF-1, 57 rats were randomly divided into three
groups: (1) autograft; (2) cryopreserved isograft; (3) cryopreserved isograft with
intraneural IGF-1. 12 weeks after surgery, the functional recovery (Walking track,
electrophysiology studies, gastrocnemius mass index (GMI)) and nerve regeneration
(histomorphometry) were assessed.
XXIV
Results
Nerve architecture was correctly preserved after cryopreservation. Cell viability
was significantly higher in the group with albumin.
In the prospective study, functional and histological results revealed significant
improvement of the variables after the addition of the growth factor as compared to
isograft alone.
Conclusions
The viability was significantly increased when albumin was added to the
cryopreservation protocol.
Intraneural injection of IGF-1 significantly improved axonal regeneration and
functional recovery, achieving results comparable to those of the autograft.
Palabras clave
Crioconservación de órganos, tejidos, etc.
Sistema nervioso-Regeneración
Isoinjertos
Sistema nervioso-Regeneración
Isoinjertos
Descripción
Programa Oficial de Doutoramento en Ciencias da Saúde. 5007V01
Derechos
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