Innovación en modelos in vitro: Resistencia a la ferroptosis en células de cáncer de ovario epitelial

Abstract

[Resumen] El cáncer de ovario epitelial se caracteriza por presentar una mortalidad elevada y un difícil diagnóstico en los estadios iniciales de su desarrollo. Es por eso por lo que surgen nuevos tipos de terapias para paliar la enfermedad, entre ellas la ferroptosis. Esta consiste en un tipo de muerte celular programada que se caracteriza por la acumulación de radicales libres de hierro en las células, lo que conduce a la pérdida de integridad de la membrana celular y finalmente a la muerte celular. En este trabajo demostramos cómo se alteran diferentes parámetros celulares, incluyendo niveles de ROS (del inglés Reactive Oxygen Species), MDA (del inglés Malondialdehyde), Fe2+ (Ión ferroso) y GSH (forma reducida del glutatión) al ser tratadas las células de las líneas celulares de cáncer de ovario epitelial A2780 y SKOV3 con los inductores ferroptóticos erastina y RSL3 (del inglés RAS Selective Lethal 3). Además, también se pretende generar líneas celulares resistentes a la ferroptosis mediante la generación de mutantes knockouts de GPX4 (del inglés Glutathion Peroxidase 4) y FSP1 (del inglés Ferroptosis Supressor Protein1) para SKOV3. Finalmente observamos que los inductores ferroptóticos logran inducir la ferroptosis en la línea celular SKOV3, pero no en A2780. Además, se consigue un posible candidato a knockout de GPX4. Las perspectivas a futuro serán continuar con la investigación de la ferroptosis para que pueda acabar convirtiéndose en un tratamiento eficaz y poder paliar así el impacto del cáncer de ovario epitelial en la sociedad.[Resumo] O cáncer de ovario epitelial caracterízase por presentar una mortalidade elevada e un difícil diagnóstico nos estadios iniciais do seu desenvolvemento. É por eso polo que surxen novos tipos de terapias para paliar a enfermidade, entre elas a ferroptosis. Esta consiste nun tipo de morte celular programada que se caracteriza por a acumulación de radicais libres de ferro nas células, o que conduce á pérdida de integridade da membrana celular e finalmente á morte celular. Neste traballo demostramos cómo se alteran diferentes parámetros celulares, incluindo niveles de ROS (do inglés Reactive Oxygen Species), MDA (do inglés Malondialdehyde), Fe2+ (Ión ferroso) e GSH (forma reducida do glutatión) ao ser tratadas as células das liñas celulares de cáncer de ovario epitelial A2780 y SKOV3 con os inductores ferroptóticos erastina e RSL3 (do inglés RAS Selective Lethal 3). Ademáis, tamén se pretende xerar liñas celulares resistentes á ferroptosis mediante a xeración de mutantes knockouts de GPX4 (do inglés Glutathion Peroxidase 4) e FSP1 (do inglés Ferroptosis Supressor Protein1) para SKOV3. Finalmente observamos que os inductores ferroptóticos logran inducir a ferroptosis na liña celular SKOV3, pero non en A2780. Ademáis, conséguese un posible candidato a knockout de GPX4. As perspectivas a futuro serán continuar con a investigación da ferroptosis para que poida acabar convertindose nun tratamento eficaz e poder paliar así o impacto do cáncer de ovario epitelial na sociedade.[Abstract] Epithelial ovarian cancer is characterized by high mortality and difficult diagnosis in the initial stages of its development. That is why new types of therapies are emerging to alleviate the disease, including ferroptosis. This consists of a type of programmed cell death that is characterized by the accumulation of iron free radicals in cells, which leads to the loss of cell membrane integrity and finally cell death. In this work we demonstrate how different cellular parameters ROS (Reactive Oxygen Species), MDA (Malondialdehyde), Fe2+ (Ferrous ion) and GSH (reduced form of glutathione) when cells from the epithelial ovarian cancer cell lines A2780 and SKOV3 were treated with the ferroptotic inducers erastin and RSL3 (RAS Selective Lethal 3). In addition, we also intend to generate for cell lines resistant to ferroptosis by generating knockouts mutants of GPX4 (Glutathion Peroxidase 4) and FSP1 (Ferroptosis Suppressor Protein1) for SKOV3. Finally, we observed that ferroptotic inducers were able to induce ferroptosis in the SKOV3 cell line but not in A2780. Furthermore, a possible GPX4 knockout candidate is obtained. The future perspectives will be to continue researching ferroptosis so that it can end up becoming an effective treatment to alleviate the impact of epithelial ovarian cancer in the society.