Desarrollo de la tecnología IgG-BioID para el estudio del interactoma humano en condiciones nativas

Abstract

[Resumen] El estudio del interactoma humano tiene un interés relevante debido a la necesidad de conocer las diferentes proteínas y sus relaciones entre ellas presentes en el cuerpo humano para, entre otras cosas, hacer frente a diferentes enfermedades. Por ello, el estudio de las interacciones proteína-proteína tiene un gran interés, y en los últimos años las técnicas que se desarrollan son mayores. Una de las técnicas más usadas es la BioID, la cual requiere en ocasiones de un elevado coste económico y temporal para poder ser utilizada. Con el fin de reducir estos costes, en el presente Trabajo de Fin de Grado comenzamos el desarrollo de la tecnología IgG-BioID con la construcción del vector GB1-TurboID, consiguiendo la expresión de la proteína en E.coli mediante un sistema de expresión basado en el promotor y la ARN polimerasa del fago T7.[Resumo] O estudo do interactoma humano ten un interese relevante debido á necesidade de coñecer as diferentes proteínas e as relacións entre elas para, entre outras cousas, facer fronte a diferentes enfermidades. Poi iso, o estudo das interaccións proteína-proteína ten un gran interese, e nos derradeiros anos as técnicas que se desenvolven son cada vez maiores. Unha das técnicas máis empregadas é a BioID, a cal precisa en ocasións dun elevado custo económico e temporal para ser empregada. Ca fin de reducir eses custos no presente Traballo de Fin de Grao comezamos o desenvolvemento da tecnoloxía IgG-BioID ca construción do vector GB1-TurboID, conseguindo a expresión da proteína en E.coli mediante un sitema de expresión baseado no promotor e na ARN polimerasa do fago T7.[Abstract] The study of the human interactome is of significant interest due to the need to understand the different proteins and their relationships within the human body in order to, among other things, address various diseases. Therefore, the study of protein-protein interactions is of great importance, and in recent years, the techniques being developed have increased. One of the most widely used techniques is BioID, which sometimes requires high economic and temporal costs to be utilized. In order to reduce these costs, in the present Bachelor's Thesis, we began the development of IgG-BioID technology with the construction of the GB1-TurboID vector, achieving the expression of the protein in E.coli using an expression system based on the T7 phage promoter and RNA polymerase.