Niveles ex vivo de marcadores autofágicos en células mesoteliales humanas

Abstract

[Resumen] La diálisis peritoneal es uno de los tratamientos a los que los pacientes con una enfermedad renal crónica pueden ser sometidos. Pese a las numerosas ventajas que presenta sobre la hemodiálisis, es menos utilizada debido a las dificultades que puede suponer la técnica. Las complicaciones infecciosas y las características bioincompatibles del líquido de diálisis inducen un deterioro progresivo en la membrana peritoneal, como consecuencia de la transición epitelio-mesenquimal (TEM), que puede conducir a un fallo de ultrafiltración. La producción de especies reactivas de oxígeno por parte de la mitocondria juega un papel fundamental como detonante de la inflamación característica de este proceso. Se ha demostrado que la autofagia regula la activación de inflamasomas como forma para limitar la inflamación. El objetivo de este proyecto es determinar si unos niveles bajos de autofagia pueden estar implicados en el estrés oxidativo que provoca la pérdida de la integridad física del tejido peritoneal. Para ello, se analizaron mediante Western-Blot los niveles de expresión de los marcadores autofágicos p62 y LC3 en células mesoteliales procedentes del efluente peritoneal de pacientes en diálisis peritoneal. El análisis de los marcadores autofágicos p62 y LC3 permitió detectar una inhibición de la autofagia en las células mesenquimales (fibroblastos) en comparación con las células epiteliales.[Resumo] A diálise peritoneal é un dos tratamentos aos que os pacientes cunha enfermidade renal crónica poden ser sometidos. Pese as súas beneficiosas vantaxes fronte á hemodiálise, é menos empregada debido as dificultades nas que pode derivar a técnica. As complicacións infecciosas e as características bioincompatibles do líquido de diálise inducen unha deterioración progresiva na membrana peritoneal, como resultado da transición epitelio-mesenquimal (TEM), que conduce a un fallo de ultrafiltración. A produción de especies reactivas de osíxeno pola mitocondria xoga un papel fundamental como detonante da característica inflamación deste proceso. Demostrouse que a autofaxia regula a activación de inflamasomas como forma de limitar a inflamación. O obxectivo deste proxecto é determinar se uns niveis baixos de autofaxia poden estar implicados no estrés oxidativo que supón a pérdida da integridade física da membrana peritoneal. Para isto, analizáronse mediante un Western-Blot os niveis de expresión dos marcadores autofáxicos p62 e LC3 en células mesoteliais procedentes do efluente peritoneal de pacientes en diálise peritoneal. A análise dos marcadores autofáxicos p62 e LC3 logrou detectar una inhicición da autofaxia nas células mesenquimáis (fibroblastos) en comparanza coas células epiteliais.[Abstract] Peritoneal dialysis is one of the treatments that patients with chronic kidney disease can undergo. Despite its many advantages over haemodialysis, it is less widely used due to the difficulties that the technique can entail. Infectious complications and the bioincompatible characteristics of the dialysis fluid induce a progressive deterioration in the peritoneal membrane, as a consequence of epithelial-mesenchymal transition (EMT), which can lead to ultrafiltration failure. The production of reactive oxygen species by mitochondria plays a key role in triggering the inflammation characteristic of this process. Autophagy has been shown to regulate inflammasome activation as a way to limit inflammation. The aim of this project is to determine whether low levels of autophagy may be involved in the oxidative stress that leads to loss of physical integrity of peritoneal tissue. For this purpose, the expression levels of the autophagic markers p62 and LC3 in mesothelial cells from peritoneal effluent of patients undergoing peritoneal dialysis were analysed by Western-Blot. Analysis of the autophagic markers p62 and LC3 detected an inhibition of autophagy in mesenchymal cells (fibroblasts) compared to epithelial cells.