Novas sondas luminiscentes para a detección de haloxenación en procesos patolóxicos

Abstract

[Resumen] Las modificaciones postraduccionales (PTMs) juegan un papel fundamental en la regulación de la función proteica, especialmente en contextos de estrés oxidativo donde pueden generarse especies reactivas que alteran residuos como la tirosina. En este trabajo se ha desarrollado y evaluado un sensor luminiscente basado en un complejo metalopeptídico de terbio, con el fin de detectar la cloración de tirosina mediante ensayos de fosforescencia. Primero se caracterizaron los complejos peptídicos Y[Tb] y ClY[Tb], estudiando sus propiedades ópticas mediante técnicas como UV-Vis, fluorescencia, fosforescencia y HPLC. A partir de estos datos se evaluó la respuesta espectroscópica del sistema tras la adición de agentes clorantes, tanto químicos (NaOCl) como enzimáticos (MPO). Si bien se observaron algunos indicios de desactivación espectroscópica compatibles con procesos de cloración, los resultados no fueron concluyentes ni reproducibles en todos los casos. Estos hallazgos ponen de manifiesto tanto las posibilidades como las limitaciones prácticas de aplicar este tipo de sensores en el estudio de PTMs oxidativas, destacando la necesidad de seguir optimizando su diseño experimental y las condiciones de ensayo para mejorar su fiabilidad y sensibilidad.[Resumo] As modificacións postraduccionales (PTMs) xogan un papel fundamental na regulación da función proteica, especialmente en contextos de estrés oxidativo onde poden xerarse especies reactivas que alteran residuos como a tirosina. Neste traballo desenvolveuse e avaliado un sensor luminiscente baseado nun complexo metalopeptídicos de terbio, co fin de detectar a cloración de tirosina mediante ensaios de fosforescencia. Se caracterización os complexos peptídicos Y[Tb] e ClY[Tb], estudando as súas propiedades ópticas mediante técnicas como UV-Vis, fluorescencia, fosforescencia e HPLC. A partir destes datos avaliouse a resposta espectroscópica do sistema tras a adición de axentes clorantes, tanto químicos (NaOCl) como encimáticos (MPO). Aínda que se observaron algúns indicios de desactivación espectroscópica compatibles con procesos de cloración, os resultados non foron completamente concluíntes nin reproducibles en todos os casos. Estes achados poñen de manifesto tanto as posibilidades como as limitacións prácticas de aplicar este tipo de sensores no estudo de PTMs oxidativas, destacando a necesidade de seguir optimizando o seu deseño experimental e as condicións de ensaio para mellorar a súa fiabilidade e sensibilidade.[Abstract] Post-translational modifications (PTMs) play a fundamental role in the regulation of protein function, especially in contexts of oxidative stress where reactive species can be generated that alter residues such as tyrosine. In this work, a luminescent sensor based on a terbium metallopeptide complex was developed and evaluated, with the aim of detecting tyrosine chlorination using phosphorescence assays. The peptide complexes Y[Tb] and ClY[Tb] were characterized, studying their optical properties using techniques such as UV-Vis, fluorescence, phosphorescence, and HPLC. Based on these data, the spectroscopic response of the system was evaluated after the addition of chlorinating agents, both chemical (NaOCl) and enzymatic (MPO). Although some evidence of spectroscopic deactivation compatible with chlorination processes was observed, the results were neither completely conclusive nor reproducible in all cases. These findings highlight both the possibilities and practical limitations of applying this type of sensor in the study of oxidative PTMs, highlighting the need to further optimize their experimental design and test conditions to improve their reliability and sensitivity.