Análisis de regiones promotoras de genes relacionados con enfermedades humanas.

Abstract

[Resumen] El cáncer de ovario es el quinto cáncer con más tasa de muerte de mujeres en los países desarrollados, siendo el más común el de origen epitelial. La comunicación intercelular es esencial para mantener la homeostasis de los tejidos al permitir la señalización en respuesta a estímulos. Entre los mecanismos de comunicación se incluyen las uniones Gap, unos canales intercelulares conformados por conexinas. La conexina 43 (Cx43) es la que más se expresa en una gran variedad de tejidos. En este trabajo caracterizamos la transcripción de la Cx43 en células epiteliales de cáncer de ovario sometidas a tratamiento con IL-1β y oligomicina como inductores de inflamación y estrés oxidativo respectivamente. Simultáneamente analizamos también la expresión de genes marcadores de inflamación y cáncer observando cambios significativos en la respuesta a los tratamientos. Tras comprobar el aumento en la expresión de Cx43, decidimos profundizar en el estudio transcripcional analizando la respuesta de los factores transcripcionales que se unen al promotor. Como resultado encontramos cambios en los patrones de unión al promotor en regiones que contienen sitios de unión para Sp1, Ap1 y NF-kB. Estos datos nuevos indican que en cáncer de ovario epitelial ocurren cambios en el patrón de unión de reguladores transcripcionales en el promotor de Cx43, en respuesta a la inflamación y estrés oxidativo inducidos con respecto a las células sanas.

[Resumo] O cancro de ovario é o quinto cáncer con máis taxa de morte de mulleres nos países desenvoltos, sendo o máis común o de orixe epitelial. A comunicación intercelular é esencial para manter a homeostasis dos tecidos ao permitir a señalización en resposta a estímulos. Entre os mecanismos de comunicación inclúense as unións Gap, uns canais intercelulares conformados por conexinas. A conexina 43 (Cx43) é a que máis se expresa nunha gran variedade de tecidos. Neste traballo caracterizamos a transcripción da Cx43 en células epiteliais de cancro de ovario sometidas a tratamento con IL-1β e oligomicina como indutores de inflamación e estrés oxidativo respectivamente. Simultáneamente analizamos tamén a expresión de xenes marcadores de inflamación e cancro observando cambios significativos na resposta aos tratamentos. Tras comprobar o aumento na expresión de Cx43 decidimos profundizar no estudo transcripcional analizando a resposta dos factores transcripcionais que se unen ao promotor. Como resultado atopamos cambios nos patróns de unión ao promotor en rexións que conteñen sitios de unión para Sp1, Ap1 e NF-kB. Estes novos datos indican que en cancro de ovario epitelial ocorren cambios no patrón de unión de reguladores transcripcionais no promotor de Cx43, en resposta á inflamación e ao estrés oxidativo inducidos, con respecto ás células sans.

[Abstract] Ovarian cancer is the fifth cancer with the highest death rate in women in developed countries, being the most common, cancer of epithelial origin. Intercellular communication is essential for maintaining tissue homeostasis by enabling signaling in response to stimuli. Communication mechanisms include gap junctions, intercellular channels made up of connexins. Connexin 43 (Cx43) is the most highly expressed connexin in a wide variety of tissues. In this work we characterized Cx43 transcription in ovarian cancer epithelial cells treated with IL-1β and oligomycin as inducers of inflammation and oxidative stress, respectively. Simultaneously we also analyzed the expression of inflammation and cancer marker genes observing significant changes in the response to treatments. After verifying the increase in the expression of Cx43 we decided to deepen the transcriptional study by analyzing the response of transcriptional factors that bind to the promoter. As a result we found changes in the promoter binding patterns in regions containing binding sites for Sp1, Ap1 and NF-kB. These new data indicate that in epithelial ovarian cancer changes occur in the binding pattern of transcriptional regulators at the Cx43 promoter in response to induced inflammation and oxidative stress with respect to healthy cells.