Optimización del estudio de la interacción física HMGB1- Moesina

Abstract

[Resumen] La proteína High Mobility Group 1 (HMGB1) es una proteína de unión a ADN que también lleva a cabo funciones citoplasmáticas y extracelulares. Se ha relacionado en estos últimos años con diferentes enfermedades, entre ellas el cáncer de ovario. Es por ello que HMGB1 se está estudiando como posible diana terapéutica en diferentes tipos de tumores, así como su implicación en procesos de resistencia a terapias antitumorales como los tratamientos con cisplatino y derivados. Asimismo, la moesina es una proteína del citoesqueleto que también se ha relacionado con diversas enfermedades, entre ellas cáncer. En este trabajo se ha llevado a cabo el proceso de optimización de la validación de la interacción HMGB1-MSN en el citoplasma de células de cáncer de ovario, mediante el testeo de los anticuerpos y la puesta a punto de la técnica conocida como Proximity Ligation Assay (PLA). Para ello, en el presente estudio se hicieron uso de distintas técnicas moleculares como la inmunofluorescencia, Western Blot, Dot Blot y PLA.[Resumo] A proteína High Mobility Group 1 (HMGB1) é unha proteína de unión a ADN que tamén leva a cabo funcións citoplasmáticas e extracelulares. Foi relacionada nestes últimos anos con diferentes enfermidades, entre elas o cancro de ovario. É por isto que HMGB1 está a ser estudiada como posible diana terapéutica en diferentes tipos de tumores, así como na súa implicación en procesos de resistencia a terapias antitumorais coma os tratamentos con cisplatino e derivados. Ademais, a moesina é unha proteína do citoesqueleto que tamén foi relacionada con diversas enfermidades. Neste traballo levouse a cabo o proceso de optimización da validación da interacción HMGB1-MSN no citoplasma de células de cancro de ovario, mediante o testeo dos anticorpos e a posta a punto da técnica coñecida coma Proximity Ligation Assay (PLA). Para isto, no presente estudo usáronse diferentes técnicas moleculares como a inmunofluorescencia, Western Blot, Dot Blot e PLA.[Abstract] High Mobility Group 1 (HMGB1) is a DNA-binding protein that also carries out cytoplasmic and extracellular functions. It has been linked in recent years to several diseases, including ovarian cancer. For this reason, HMGB1 is being studied as a possible therapeutic target in different types of tumours, as well as its involvement in processes of resistance to anti-tumour therapies such as treatments with cisplatin and its derivatives. Likewise, moesin is a cytoskeletal protein that has also been linked to various diseases. In this work, the process of optimising the validation of the HMGB1- MSN interaction in the cytoplasm of ovarian cancer cells has been conducted by testing the antibodies and tuning the technique known as Proximity Ligation Assay (PLA). For this purpose, different molecular techniques such as immunofluorescence, Western Blot, Dot Blot and PLA were used in this study.