Estudio "in vitro" de la diferenciación condrogénica de células madre mesenquimales, procedentes de médula ósea humana, sobre biomateriales de colágeno

Abstract

Introducción: La osteoartritis es una enfermedad degenerativa caracterizada por la degradación del cartílago y el hueso subcondral. En la actualidad no existen tratamientos eficaces que la curen, siendo la terapia celular una herramienta prometedora para la formación de cartílago hialino. Las células madre mesenquimales (CMMs) se obtienen con facilidad de multitud de tejidos, entre ellos la médula ósea (CMMs-MOh). La combinación de terapia celular empleando CMMs-MOh con scaffolds que aporten un sustrato adecuado para su proliferación y diferenciación hacia condrocitos, favorece la formación de cartílago funcional que podría ser empleado posteriormente para la regeneración de las zonas dañadas. Objetivos: Evaluar la capacidad de diferenciación condrogénica in vitro de CMMs-MOh cuando son cultivadas sobre biomateriales de colágeno. Material y métodos: Las células se aislaron de MOh y se caracterizaron. Posteriormente se sembraron sobre los biomateriales constituidos por colágeno y heparán sulfato (HS) en distintas proporciones, cultivándose en medio de inducción condrogénico durante 30 días. Transcurridos 15 y 30 días de cultivo, se evaluó el grado de diferenciación condrogénica de las células, así como la calidad del tejido neo-sintetizado in vitro. Para ellos se emplearon técnicas de biología molecular, microscopía electrónica, histológicas e inmunohistoquímicas. Resultados: Las células aisladas de la MOh mostraban capacidad de diferenciación osteogénica y condrogénica, además de un perfil de marcadores de membrana característico de CMMs-MOh. Transcurridos los 30 días de cultivo, en todos los biomateriales se observó un elevado porcentaje celular y gran cantidad de matriz extracelular, distribuidos homogéneamente por la totalidad del biomaterial. En la MEC secretada por las células se detectó expresión de marcadores característicos de cartílago hialino. El ARN de las células diferenciadas expresó marcadores específicos de linaje condrogénico. Por último, seprodujo liberación de colágeno al medio de cultivo por parte de las células. Conclusiones: Los biomateriales de colágeno son un soporte adecuado para permitir la diferenciación condrogénica de CMMs-MOh y la neo-formación de un tejido cartilaginoso