Nanopartículas basadas en polietilenimina para a entrega de xenes a células mesenquimáis

Abstract

[Resumen] Las células madre mesenquimales son cada vez más empleadas como recurso en medicina regenerativa y terapia génica por sus numerosas propiedades, entre las que destacan su capacidad de regeneración y diferenciación. En este contexto, una de las estrategias más empleadas para la entrega de genes es el uso de polímeros catiónicos. Estos presentan propiedades fisicoquímicas modificables lo cual los hace extremadamente versátiles y adaptables, además de presentar un bajo costo y ser fáciles de manejar. Entre estos polímeros, uno de los más interesantes es la polietilenimina, pues muestra importantes ventajas con respecto al resto de polímeros a la hora de ser internalizado en la célula. En el presente trabajo se testaron diferentes concentraciones de PEI como vector no viral de transferencia de genes en cultivos de una línea celular inmortalizada de MSCs con el fin de encontrar una concentración que presentase altas eficiencias de transfección y alta viabilidad celular en este tipo celular, empleando como gen reportero el plásmido lacZ. Los resultados obtenidos mostraron que concentraciones de 2.5 μg/mL de PEI presentan eficiencias y viabilidades comparables a las del reactivo comercial Lipofectamina.

[Resumo] As células nai mesenquimáis son cada vez máis empregadas como recurso en medicina rexerativa e terapia xénica polas súas numerosas propiedades, entre as que destacan a súa capacidade de rexeneración e diferenciación. Neste contexto, unha das estratexias máis empregadas para a entrega de xenes é o uso de polímeros catiónicos. Estes presentan propiedades fisicoquímicas modificables o cal os fai extremadamente versátiles e adaptables, ademais de presentar un baixo custo e ser fáciles de manexar. Entre estes polímeros, un dos máis interesantes é a polietilenimina, pois mostra importantes vantaxes con respecto ao resto de polímeros á hora de ser internalizado na célula. No presente traballo testáronse diferentes concentracións de PEI como vector non viral de transferencia de xenes en cultivos dunha liña celular inmortalizada de MSCs coa fin de atopar unha concentración que presentase altas eficiencias de transfección e alta viabilidade celular neste tipo celular, empregando como xen reporteiro o plásmido lacZ. Os resultados obtidos mostraron que concentracións de 2.5 μg/mL de PEI presentan eficiencias e viabilidades comparables ás do reactivo comercial Lipofectamina.

[Abstract] Mesenchymal stem cells are increasingly used as a resource in regenerative medicine and gene therapy due to their numerous properties, including their ability to regenerate and differentiate. In this context, one of the most widely used strategies for gene delivery is the use of cationic polymers. These have modifiable physicochemical properties which make them extremely versatile and adaptable, in addition to being low cost and easy to handle. Among these polymers, one of the most interesting is polyethylenimine, as it shows important advantages over other polymers when it comes to being internalized in the cell. In the present work, different concentrations of PEI as a non-viral vector of gene transfer in an immortalized cell line of MSC cultures were tested in order to find a concentration that presented high transfection efficiencies and high cell viability in this cell type, using the plasmid lacZ as a reporter gene. The results obtained showed that concentrations of 2.5 μg/mL of PEI have efficiencies and viabilities comparable to those of the commercial reagent Lipofectamine.