Estudio de los genes KIPDCB y KIGSK-3 de la levadura "Kluyveromyces lactis"

Abstract

[Resumen] En el presente trabajo se ha secuenciado una región de 5kb de DNA del cromosoma seis de la levadura Kluyveromyces Lactis, en la que se han identificado dos pautas de lectura abierta, las cuales se han subclonado y se ha realizado su análises funcional. La predición de función basada en homologías respecto a secuencias recopiladas en las bases de datos puso de manifiesto que uno de los genes (KLPDCB), de bajo nivel de expresion, posee una gran similitud con piruvato descarboxilasas de distintos orígenes, mientras que el otro (KLGSK-3) pertenece a una familia de protein-quinasas. Se han interrumpido ambos genes siendo los fenotipos mas característicos mostrados por los mutantes nulos: en el primer caso, disminución drástica del crecimiento en medios carentes de tiamina, en el segundo, ausencia de crecimiento en glucosa y etanol a 37 grados C. Y disminución del almacenamiento de glucógeno. También se han realizado análisis de la secuencia de los promotores así como análisis de expresión mediante Northern-Blot, Rt-Pcr y fusiones a genes marcadores, todo ello acompañado de una exhaustiva revisión bibliográfica.