Inmortalización de células madre mesenquimales humanas con el antígeno T del virus SV40

Abstract

Las células madre mesenquimales (CMMs) son células madre adultas multipotentes con una alta capacidad de proliferación, cultivables in vitro y que presentan propiedades inmunomoduladoras y antiinflamatorias. Es por ello que tienen un gran interés en investigación y en terapia celular para el estudio y el tratamiento de enfermedades crónicas en las que se requiere la regeneración de tejidos, como es el caso de la artrosis, una enfermedad degenerativa de las articulaciones que afecta al 20% de la población mundial y al 70% de los mayores de 60 años, para la que actualmente no existe ningún tratamiento capaz de regenerar el tejido dañado. Sin embargo, para estas aplicaciones es necesario expandir las CMMs in vitro, y este proceso puede acabar provocando la senescencia de las células y la adquisición de alteraciones relacionadas con la misma. Una forma de evitar la senescencia de las células humanas en cultivo es obtener una línea celular con un fenotipo estable y una capacidad de proliferación ilimitada mediante la inmortalización de las células por transfección de genes virales, como el antígeno T del virus SV40 (SV40 LT), o humanos, como el gen de la transcriptasa reversa de la telomerasa humana (hTERT). Por estos motivos se planteó el objetivo de este proyecto de investigación, que fue la obtención de líneas celulares para el estudio de la artrosis mediante la inmortalización de CMMs humanas procedentes de la médula ósea (CMMs-MO) de un paciente con artrosis y un donante sano. Aunque no se ha conseguido la generación de una línea celular, con el protocolo de inmortalización empleado se han obtenido algunos resultados prometedores que constituyen la base para continuar esta investigación, ya que se ha conseguido generar retrovirus portadores de la región codificante temprana del virus SV40 y transfectar de forma eficiente CMMs-MO de dos pacientes con artrosis y un donante sano con estos retrovirus.