Desarrollo de un método de separación cromatográfica de especies de selenio mediante HPLC-IPC-MS

Abstract

[Resumen] En este trabajo se optimiza un método de separación cromatográfica de especies de selenio (selenocisteína, selenometeonina, selenometilcisteía, selenito y selenato) mediante cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) y detección mediante espectrometría de masas con plasma de acoplamiento inductivo (ICP-MS). En primer lugar, se ajustaron las condiciones instrumentales de operación del ICP-MS. Posteriormente, utilizando una columna de intercambio aniónico Hamilton PRP X-100 (250 x 4 mm d.i.), se estudiaron diferentes parámetros para optimizar la separación cromatográfica: Temperatura de la columna, programa de elución, concentración, pH, porcentaje de metanol y flujo de la fase móvil. Tras la selección de las condiciones más adecuadas, se calcularon los límites de detección y cuantificación y la precisión del método propuesto. Por último, tras la selección de las condiciones de separación más adecuadas, se ensayó la posibilidad de utilizar diferentes métodos de extracción que cumpliesen con los principios de la Química Verde. La aplicación de estos métodos tuvo como finalidad la extracción de especies de selenio en un alga verde (Ulva rigida).

[Abstract] In this project, a chromatographic separation method for selenium species is optimized by High-performance liquid chromatography (HPLC) and inductively coupled plasma mass spectrometry. First of all, instrumental conditions were adjusted for the ICP-MS operation. Then, using an anion exchange column Hamilton PRP X-100 (250 x 4 mm i.d.), some parameters were studied to optimize the chromatographic separation: column temperature, elution programme, and mobile phase concentration, pH, percentage of methanol and flow. After the selection of the most suitable conditions, the detection and quantification limits and precision of the proposed method were calculated. Finally, after the selection of the most suitable conditions the possibility of using Green Chemistry extraction methods was tested. The application of these methods was aimed at extracting selenium species from green algae (Ulva rigida).

[Resumo] Neste traballo optimizase un método de separación cromatográfica de especies de selenio (selenocisteína, selenometeonina, selenometilcisteía, selenito y selenato) mediante cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) e detección mediante espectrometría de masas con plasma acoplado indutivamente (ICP-MS). En primeiro lugar, as condicións instrumentais de operación do ICP-MS foron axustadas. Posteriormente, estudáronse varios parámetros para optimizar a 7 separación cromatográfica: A temperatura da columna, programa de elución, concentración, pH, porcentaje de metanol e o fluxo da fase móbil. Posteriormente calcúlanse os límites de detección e cuantificación e a exactitude do método proposto. Por último, probase a posibilidade de utilizar diferentes métodos de extracción de Química Verde. A aplicación destes métodos pretendía a extracción das especies de selenio nunha alga verde (Ulva rigida).